上海
业务范围:实验室仪器 / 设备、试剂、技术服务、细胞库 / 细胞培养
经营模式:代理商 生产厂商
在线沟通 电话 QQ 联系细胞冻存操作的时候会遇到很多问题,操作不慎可能导致细胞死亡或复苏时活性不佳。今天为大家整理了一些常见细胞冻存问题。
无血清冻存液操作流程:
准备细胞悬液:首先,将细胞培养至对数生长期,然后收集细胞,进行细胞计数。
离心细胞:将细胞悬液放入离心管中,离心以收集细胞。离心条件通常为1200rpm或250g,离心时间大约3分钟。
去除上清液:离心后,尽量吸干净上清液,减少培养基残留,避免稀释冻存液。
加入无血清冻存液:将无血清冻存液提前从冰箱中取出,回温至室温。然后,加入适量的无血清冻存液到细胞中,重悬细胞。
调整细胞浓度:依据推荐,将细胞浓度调整在3×10^6^至1×10^7^ cells/mL之间。
分装冻存管:将重悬后的细胞悬液分装入冻存管中,每个冻存管分装0.5到1.5毫升。
直接放入超低温冰箱:分装好的冻存管可以直接放入-80℃的冰箱中过夜。
转移到液氮:24小时后,将冻存管从-80℃冰箱中取出,快速转移到液氮中进行长期保存。
注意事项
1. 在转移过程中,需要做好保冷措施,避免冻存管暴露于常温后融化;
2. 在整个操作过程中,注意实验室安全和个人防护,特别是在使用液氮时。
细胞冻存是将细胞在低温条件下保存的方法。这种方法可以将细胞长期保存,方便后续使用。但在冻存细胞时,应注意以下几点:
1、选择适当的冻存液:通常使用生理盐水、DMSO或乙二醇作为冻存液。不同的冻存液对细胞的影响不同,应根据需要选择适当的冻存液。
2、适当控制冻存过程:冻存过程中的温度和时间应适当控制,以防止细胞受到损伤。一般来说,应将细胞先冻存在-80℃,然后将其移到低温冰箱(-150℃~-196℃)保存。
3、注意冻存液的浓度:冻存液的浓度应适当控制,过高或过低的浓度都会对细胞造成损伤。一般来说,冻存液的浓度应在5%~10%之间。
4、注意冻存条件:冻存细胞时应注意冻存条件,以防止细胞损伤。冻存条件包括冻存液的pH值、温度、湿度等。
5、注意冻存细胞的质量:冻存细胞时应注意细胞的质量,确保细胞质量较高。一般来说,细胞质量越高,冻存后的活性越好。
记录冻存信息:在冻存细胞时,应记录冻存信息,包括冻存时间、冻存液的种类和浓度、冻存温度等。这些信息对于后续使用冻存细胞时很重要。
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1. 不合动物源成分,病毒、霉菌和支原体等污染可能性低,各批产品之间有更高的产品质量一致性;
2. 成分明确,无批次差异;
3. 可直接存放于-80°C冰箱冻存,无需经过费时的程序降温过程(省时、省力、省钱);
4. 独特配方有效提高细胞冻存存活率及复苏率;
5. 即用型,无需现配,即开即用;
6. 可微量,原位冻存,例如杂交瘤细胞的冻存,省时高效;
7. 通用型,适用于冻存各种细胞系,原代细胞。
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乔新舟生物研发的无血清细胞冻存液(货号:CSP042 )。
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不含动物来源性蛋白, 不含血清,可减少各类细菌、病毒和支原体等污染,保证冻存细胞的安全。
通用于各种动物细胞株(肿瘤细胞和常规细胞), 冻存细胞可在-80℃长期保存( 5 年)。