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「免疫病理检查」免疫病理检查的介绍

免疫病理检查对过敏原筛选、湿疹等多种疾病有诊断意义。皮肤斑贴试验 :湿疹、接触性皮炎、职业性皮肤病等患者。癣菌素试验 :原发真菌感染灶发疹部位真菌阴性毛癣菌素试验阳性排除类似疾病的患者。过敏原筛选 :皮肤过敏造成的疾病包括荨麻疹、接触性皮炎、异位性皮炎等皮肤病患者


1.标本处理①将需要的皮肤标本用手术或钻孔取下后,立即用OCT复合物包埋剂包埋固 定或将标本用湿润的生理盐水纱布包裹,4℃下保存,24小时内用OCT复合物包埋剂包埋。②OCT复合物包埋剂包埋的标本,经速冻后在-22℃~-25℃条件下将组织切成厚度为4~6μm的薄片,置于玻片上。

2. 直接免疫荧光法:将冷冻切片用0.01mol/L、pH7.4的PBS清洗10分钟,晾干后滴加适当稀释的荧光标记的抗人免疫球蛋白抗体,在37~C湿盒中孵育30~60分钟,再用0.01mol/L、pH7.4的PBS洗涤3次后晾干,用碳酸甘油缓冲液封片,置于荧光显微镜下观察。

3. 间接免疫荧光法:标本来自正常人皮肤或动物组织(如鼠肝印片);首先将灭活的适当稀释的患者血清滴于标本上,置于37℃湿盒中30~60分钟,再用0.01mol/L、pH7.4的PBS洗涤3次,晾干,后续步骤同直接法。

4. 盐裂皮肤免疫荧光法:取患者的皮损或正常人皮肤标本,置于1mol/L的NaCl溶液中,放在4℃冰箱中用磁力搅拌器低速搅动,每24小时换液一次,经过72小时左右,表皮与真皮分离,OCT包埋进行DIF或IIF检查。

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