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KLKs基因表达对卵巢癌恶性度评估初探(论著)

  实验分组:良性肿瘤组:卵巢良性上皮肿瘤组织32例,正常卵巢组织18例。卵巢癌组织43例。病理类型:在全部卵巢癌组中恶性肿瘤占43例,年龄40~70岁。手术分期是:恶性肿瘤组别,Ⅰ期5例,Ⅱ期11例,Ⅲ期18例,Ⅳ期9例。

 1.2 试剂和方法

 KLK10,KLK11兔抗人单克隆抗体购自美国RD公司,二抗购自美国罗氏公司,DAB购自美国罗氏公司。

 采用免疫组化LDp法,抗KLKn的单抗工作浓度均为1:25。①常规切片脱蜡浸水,通过3%过氧化氢阻断内源性组织过氧化物酶;②10 min后室温下进行高压抗原修复;③HarriS苏木淡染精细胞核l min,洗片用流水,添加PBS缓冲液;④加抗KLKll单抗(工作浓度1:25),4 ℃过夜;⑤第二日用PBS缓冲液以冲洗切片3次,5 min/次;⑥加Envision TM试剂,37 ℃孵箱内20 min;⑦PBS冲洗3次,5 min/次;⑧DAB/H2O2显色,于光镜下进行控制,纯水对呈色反应进行终止;⑨常规脱水到封片。选择已知的阳性组织切片作为阳性对照,以PBS替代抗KLKn单抗以作空白对照。

 1.3 观察指标

 Klk10 ...... 上一页 第 1 2 页
 百拇医药网 http://www.100md.com/html/paper/1674-0742/2015/14/05-1.htm
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