[摘要] 目的 通过 CRISPR/Cas9获得UOX基因敲除的小鼠纯合品系，为建立高尿酸血小鼠动物模型奠定基础。方法根据小鼠 UOX 基因第三外显子前后两个位点设计双sgRNA，通过PCR、体外转录和纯化获得sgRNA和Cas9 mRNA。将sgRNA和Cas9 mRNA显微注射进小鼠原核胚后，体外培养至二细胞胚阶段，进行胚胎移植至代孕母鼠。F0代小鼠出生后，提取其DNA进行电泳分析和测序分析。F0代交配繁殖至F2代获得UOX缺失的小鼠纯合品系。 结果 显微注射sgRNA和Cas mRNA至原核胚，成功获得50枚囊胚。移植后生育17只幼鼠。其中，有 8只小鼠UOX基因缺失突变，突变率为47.06 %。成功构建了UOX缺失的小鼠纯合品系。 结论 利用 CRISPR/Cas9，成功获得 UOX缺失的小鼠胚胎和纯合品系，为CRISPR/Cas9获得高尿酸血的小鼠动物模型奠定基础 ...... 第 1 2 3 4 页 下一页
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