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人TBC1D10C基因过表达慢病毒载体的构建及功能鉴定

  【摘要】 目的 构建人TBC1D10C(hTBC1D10C) 基因过表达慢病毒载体,并对其进行功能鉴定。方法 利用PCR技术扩增hTBC1D10C基因片段,构建pLVX-hTBC1D10C-mCMV-ZsGreen-PGK-Puro过表达载体质粒,将构建的过表达载体质粒和系统包装质粒应用高效转染试剂盒转染至293T细胞,以包装rLV-hTBC1D10C-zpp,在HEK293細胞中检测病毒滴度。rLV-hTBC1D10C-zpp感染H9C2心肌细胞,蛋白免疫印迹法检测hTBC1D10C 蛋白表达。结果 pLVX-hTBC1D10C-mCMV-ZsGreen-PGK-Puro过表达质粒构建成功,rLV-hTBC1D10C-zpp包装顺利,滴度为1×108 TU/ml,感染H9C2心肌细胞后,hTBC1D10C蛋白表达上调(P 第 1 2 3 页 下一页
 百拇医药网 http://www.100md.com/html/paper/0253-9802/2020/01/05.htm
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