第1页参见附件(360KB，4页)。
[摘要]目的 研究早期、中期、晚期胃癌和不典型增生及慢性胃炎中细胞核转录因子.κBp65(NF.κBp65)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达，探讨胃癌发生、浸润和转移过程中NF.κBp65、VEGF的表达和微血管密度(MVD)的关系及其临床意义。 方法 收集1997年～2002年期间经术后病理证实的早期、中期和晚期胃癌患者62例作为研究对象，同时将15例不典型增生及20例慢性胃炎患者作为对照，进行免疫组织化学染色，检测NF.κBp65、VEGF的表达和MVD，分析它们之间的关系及其意义。 结果 胃癌组中NF.κBp65、VEGF的表达阳性率分别为62.9%、51.6%，而对照组的NF.κBp65、VEGF的表达阳性率仅为17.1%、11.4%，胃癌组与对照组NF.κBp65、VEGF的表达阳性率差异有显著性(均为P 1 资料与方法
1.1 研究对象
收集1997年1月～2002年12月经手术病理证实的早期胃癌29例、中期胃癌13例、晚期胃癌20例，其中有淋巴结转移者20例。重新制作石蜡切片，分别进行NF.κBp65、VEGF和第Ⅷ因子相关抗原标记微血管内皮细胞的免疫组织化学(简称免疫组化)染色，用PBS代替第一抗体作为空白对照。另将20例慢性胃炎和15例不典型增生患者作为对照。
1.2 试剂
兔抗人NF.κBp65单克隆抗体(SC.8008)、VEGF单克隆抗体(SC.7269)、兔抗人Ⅷ因子相关抗原多克隆抗体(ZA.01)购自美国Santa Cruz公司。免疫组化染色(S.P法)按说明书步骤进行。
1.3 免疫组化结果判断
NF-κBp65免疫组化阳性产物呈棕黄色细颗粒状，主要定位于肿瘤细胞浆和核膜。在高倍镜下进行计数，计数100个细胞，表达强度依照阳性产物着色强度按Handel的分级标准记分 [5] :阴性 2 结果
2.1 NF.κBp65和VEGF的表达情况
胃癌组NF.κBp65表达阳性率为62.9%(39/62)，对照组为17.1%(6/35)，胃癌组与对照组NF.κBp65阳性表达差异有显著性(χ 2 =18.83，P0.05)。见表1。
表1 胃癌组和对照组MVD的比较(略)
2.3 NF.κBp65、VEGF表达与MVD值的关系
胃癌患者有淋巴结转移者MVD值为28.25±10.09，无淋巴结转移者为22.90±8.18，两者差异有显著性(P 3 讨论
NF.κB是1986年Sen和Baltimore首先从B淋巴细胞核提取物中检出的，可与免疫球蛋白的轻链增强 子κB序列特异结合的核蛋白因子。NF.κB的亚单位有RelA/(p65)、RelB、C.Rel、p50(NF.κB 1 )和p52(NF.κB 2 )。细胞在静息状态下，NF.κB以无活性的潜在状态存在于细胞浆中，它与一种抑制因子IκB(Inhibitors of kappa B)结合组成异源二聚体p50/p65.IκB。有活性的DNA结合的NF.κB是一个二聚体，标准的NF.κB是p50.p65的二聚体。
众所周知，胃癌组织学演变过程，包括浅表性胃炎—萎缩性胃炎—肠化生—不典型增生—胃癌，是胃癌发生的经典过程 [8] 。研究发现NF.κBp65的表达阳性率在早期胃癌、中期胃癌和晚期胃癌3组间存在显著性差异，NF.κBp65的表达阳性率从慢性胃炎、不典型增生向胃癌组逐渐增高。随着胃癌的浸润深度不同，NF.κBp65的阳性表达率也逐渐上升。NF.κB的表达阳性率随着胃癌的浸润加深逐渐升高，VEGF表达也呈现升高的趋势，胃癌的NF.κB的表达与VEGF表达呈明显相关性。而MVD的改变则直接与VEGF有关。所以，在胃癌演变过程中，NF.κB可能促进VEGF的产生，从而促进胃癌的浸润和转移。本研究结果表明，NF.κB蛋白表达和胃癌的血管生成显著相关，进一步佐证了NF.κB对多种肿瘤相关因子和肿瘤血管生成的多个环节具有调节作用的理论。
目前认为，VEGF是迄今鉴定出来的最重要的血管生成因子，可作为肿瘤代谢及转移的标记 [9] 。肿瘤细胞可分泌VEGF诱导肿瘤血管形成，从而支持肿瘤生长。VEGF还可诱导淋巴管增生和扩张，使肿瘤细胞进入淋巴管和淋巴结导致转移。胃腺癌组织中VEGF阳性高表达与早期胃癌的转移和晚期胃癌的预后密切相关 [10] 。
本组结果显示，在62例胃癌中有32例VEGF蛋白阳性表达，占51.6%。随着胃癌的浸润加深，VEGF的表达阳性率也逐步上升，说明VEGF的表达与浸润的深度有相关性。而在对照组，慢性胃炎、不典型增生组VEGF仅有少量表达，这说明胃癌细胞具有分泌VEGF的特性，并具有较好的特异性。在34例VEGF表达阳性的胃癌患者中，MVD值明显高于VEGF阴性者，差异有显著性(P[参考文献]
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[作者简介] 陈伟(1964-)，男，江苏扬州人，副主任医师，医学硕士。
(马鞍山市马钢医院消化科，安徽马鞍山 243000;安徽医科大学第一附属医院消化科，安徽合肥 233000)
http://www.100md.com/html/paper/1671-7562/2004/02/09.htm
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