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 参见附件。

  宫颈糜烂是妇女常见的疾病之一，其病因复杂，多为葡萄球菌、链球菌、大肠埃希菌和厌氧菌感染所致[1]，目前解脲支原体(UU )感染率不断增加，UU感染与宫颈糜烂的相关性也引起关注。本资料用荧光定量PCR方法对300例患宫颈糜烂的妇女宫颈分泌物进行检测，以探讨UU感染在宫颈糜烂发病机制中的作用。

 1 材料与方法

 1.1 研究对象：2009 年3月～2009 年12月在我院妇科门诊就诊的300例患宫颈糜烂的妇女。根据糜烂的面积将患者分为3组[1]，轻度组：糜烂面积小于整个宫颈面积的1/3；中度组：糜烂面积占整个宫颈面积的1/3～2/3；重度组：糜烂面积占整个宫颈面积的2/3以上。

 1.2 方法

 1.2.1 标本采集：月经干净后2～7天，窥阴器暴露宫颈后，用消毒无菌棉球擦拭宫颈表面，无菌棉签伸入宫颈口内2.0cm处，缓慢顺时针旋转2～3周取出，置于含2～3ml生理盐水的试管中，洗脱细胞及分泌物，-20℃冰箱保存待检。

 1.2.2 试剂和仪器：荧光定量PCR试剂盒由美国罗氏诊断生产，采用美国ABI Prism 7300 Real Time PCR扩增仪进行检测。

 1.2.3 实验方法：按试剂盒说明书操作，将洗脱细胞及分泌物的生理盐水，充分振荡，吸取液体转至1.5ml离心管中，3000 rpm 离心10分钟。吸取多于液体，在沉淀中加入50ul DNA 提取液充分混匀，100度干预10 分钟，常温下静置，120000 rpm 5分钟，上清备用。再行PCR扩增，循环条件为：93度 45秒，55度 60秒，10个循环；93度 30秒，55度45秒，30个循环。最后分析结果并记录数据。

 1.3 统计学方法：本资料采用SPSS10.0软件，分类资料采用t检验，P
 http://www.100md.com/html/paper/1674-9855/2012/05/283.htm
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