当前位置: 首页 期刊 《中国当代医药》 2018年第33期 编号：13266631 蛋白激酶C活化对兔视网膜色素上皮细胞抗氧化能力的影响及机制研究(1) http://www.100md.com 2018年11月25日 《中国当代医药》 2018年第33期 蛋白激酶C活化对兔视网膜色素上皮细胞抗氧化能力的影响及机制研究,核因子E2相关因子2,谷胱甘肽   [摘要]目的 通過激活兔视网膜色素上皮细胞(RPE)内蛋白激酶C(PKC)，观察RPE细胞核内转录因子E2相关因子2(Nrf2)的表达情况以及细胞内谷胱甘肽(GSH)的表达水平。方法 应用免疫荧光染色鉴定原代培养兔视网膜色素上皮细胞(RPE)，将第3代RPE细胞分为空白对照组(15%胎牛血清的DMEM培养液，n=8)、PMA组(15%胎牛血清的DMEM培养液+4 μl 100 nmol/L PKC特异激活剂佛波酯溶液，n=8)和PMA+BST组(用4 μl 10 μmol/L Nrf2抑制剂鸦胆苦醇溶液预处理RPE细胞1 h后，吸出并加入含PMA 4 μl 100 nmol/L的15%胎牛血清的DMEM培养液，n=8)，培养24 h后，采用Western-blot方法检测Nrf2蛋白在胞质和胞核内的表达，采用GSH试剂盒检测各组RPE细胞内GSH的表达，对细胞核内Nrf2及细胞内GSH表达进行相关性分析，采用免疫荧光染色检测Nrf2蛋白在细胞内转位情况。结果 RPE细胞胞质内可见黑色素颗粒，呈长梭形，鼠抗人角蛋白(AE1/AE3)免疫荧光染色鉴定呈强阳性；Western blot检测结果显示 ...... 第 1 2 3 4 页 下一页
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