[摘要] 目的 探讨乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)、生存素(Survivin)及抑癌基因P53在肝细胞癌(HCC)中的表达及意义。 方法 采用SP免疫组化方法检测58例HCC患者中HBx、Survivin及P53蛋白的表达，并分析其与临床病理特征的关系。 结果 HCC组织中HBx的表达率为46.6%(27/58)。HBx蛋白阳性的HCC组织和HBx蛋白阴性的HCC组织中Survivin、P53蛋白的阳性表达率分别为70.4%(19/27)、74.1%(20/27)和35.5%(11/31)、38.7%(12/31)，组间比较差异均有统计学意义(均P , 百拇医药
 [中图分类号] R575.2[文献标识码] A[文章编号] 1673-7210(2012)03(a)-0030-03

 越来越多的研究表明，乙型肝炎病毒(HBV)X基因及其编码的X蛋白(HBx)在乙型肝炎病毒相关肝癌发生起主要作用。P53突变存在于一半以上数量的人类肿瘤中，大约75%的肝细胞癌有P53突变。大部分肿瘤的发生都涉及凋亡障碍，Survivin是凋亡抑制蛋白(inhibitors of apoptosis protins，IAP)家族的成员，是迄今发现最强的凋亡抑制因子。本研究探讨三者在58例肝细胞癌中的表达及其与临床病理特征的关系。

 1 资料与方法

 1.1 一般资料

 选取2000年2月～2010年5月廉江市人民医院手术切除并经病理组织学检查确诊为肝细胞癌(HCC)且有完整随访资料的标本58例，患者均未经过任何抗肿瘤治疗，HbsAg均为阳性。其中，男46例，女12例；年龄23～86岁，中位年龄60岁；AFP≥400 μg/L 47例，AFP, 百拇医药
 1.2 试剂

 HBx蛋白抗体和兔抗人Survivin mAb(1∶150)，鼠抗人P53单克隆抗体及S-P试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

 1.3 免疫组织化学染色

 采用SP免疫组织化学法检测HBx、Survivin和P53蛋白的表达，按试剂盒说明书操作步骤严格进行操作。用已知阳性组织切片做阳性对照，以PBS液代替一抗作阴性对照。

 1.4 结果判定标准

 参照蒋成英等[1]的判断标准。阳性细胞计数：随机选择5个高倍视野，染色细胞, 百拇医药
 1.5 统计学方法

 根据实验资料的性质，采用SPSS 13.0软件进行统计学分析，计数资料采用χ2检验，相关分析采用Spearman等级相关系数，以P , 百拇医药
 2.2 HBx、Survivin、P53的表达与临床病理特征的关系

 HBx染色的阳性率与AFP水平和分化程度相关，Survivin染色的阳性率与TNM分期和淋巴结转移相关，P53染色的阳性率与门静脉癌栓和肿瘤直径相关。见表1。

 2.3 HBx与Survivin、P53的相关性

 HBx蛋白阳性的HCC组织和HBx蛋白阴性的HCC组织中Survivin、P53蛋白的阳性表达率分别为70.4%(19/27)、74.1%(20/27)和35.5%(11/31)、38.7%(12/31)，Spearman等级相关分析提示，HBx与Survivin、P53表达正相关(r = 0.413 6、 0.432 2，P , 百拇医药
 P53是目前公认的与肿瘤发生发展相关性最高的抑癌基因之一。ASPP(P53凋亡刺激蛋白) 家族成员ASSP1和ASSP2可与P53特异性结合，促进P53与凋亡基因的启动子结合使其超活化，发挥其肿瘤抑制作用，HBx蛋白使ASSP2启动子甲基化使基因表达发生表观遗传学沉默，导致ASSP2及ASSP1表达下调，使P53的抑癌作用发生缺陷[5]。X蛋白对凋亡的影响是其致癌作用的主要机制之一，X蛋白对凋亡具有双重调节作用，主要是凋亡抑制。X蛋白诱发凋亡抑制的方式有多种途径，但最重要的功能是抑制P53介导的凋亡，X蛋白在细胞质内与P53形成复合物，阻止P53进入细胞核，阻断其转录控制和转录激活性能，同时干扰P53与其他凋亡通路上的蛋白因子相互作用[6]。本研究表明在HBx蛋白阳性的肝细胞癌中突变型P53表达明显升高，提示野生型P53功能被抑制，肝癌生长的动力学发生改变，肿瘤细胞倍增时间缩短，生长分数增加。本研究观察到的临床病理特征为突变型P53表达明显升高与肿瘤直径及门脉癌栓相关。

 Survivin是一种在大多数人类肿瘤中过表达的凋亡抑制蛋白，过表达可以使有丝分裂畸变的细胞逃逸G2/M检测点(checkpoint)，避免发生有丝分裂灾变形成异常分裂，最终形成癌变[7]。X蛋白使Survivin表达上调导致凋亡抵抗，新近发现的G2/M期相关基因HURP(hepatoma up-regulated protein)，现有研究表明它具有癌基因特性，为Aurora-A癌基因的重要下游效应分子。由X蛋白诱发的Survivin上调是HURP依赖的。X蛋白激活HURP表达是通过丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPKs)信号通路实现的，最终形成Survivin积累，发生凋亡抑制[8]。Survivin染色的阳性率与TNM分期和淋巴结转移相关，表明Survivin主要在G2/M起作用，与肿瘤进展有关。, 百拇医药(陈江 杨柳明 崔彬 王丽红 姜汉国) 第 1 2 页 下一页
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