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 邬婧 戎隆富 程婷 许培 宋礼华 安徽大学;安徽安科生物工程(集团)股份有限公司;安徽生物研究所;

 【摘要】目的:建立聚乙二醇化重组人干扰素α-2b(PEG-rhIFNα-2b)注射液纯度测定方法。方法:采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE),对凝胶银染并扫描;采用体积排阻高效液相色谱法(SEC-HPLC),使用TSKG3000SW(7.8mm×300mm)凝胶柱,流动相:0.2mol·L-1PB-0.2mol·L-1NaCl-异丙醇(48.5/48.5/3,v/v);流速:0.6ml·min-1;检测波长:280nm;采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC),使用C8(4.6mm×250mm)色谱柱,流动相:A液:0.1%三氟乙酸溶液;B液:95%乙腈的A液,梯度:0%~100%B(30min);流速:1mL·min-1;检测波长:214nm。结果:三种方法测得PEG-rhIFNα-2b的纯度分别为100%、100%、98.90%。结论:三种方法均适用于PEG-rhIFNα-2b注射液纯度测定,检测结果符合生物制品质量控制规定。

 【关键词】 聚乙二醇化重组人干扰素α-b 纯度 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法 分子排阻HPLC 反相HPLC

 【分类号】Q503

 前言自上个世纪80年代以来,聚乙二醇化(PEGylation,PEG)技术在长效重组人干扰素(Recombinant Human Interferon,rhIFN)的制备研究中已经取得了很大的进展,成为近年来医药领域研究的热点之一。目前上市的产品有美国先灵葆雅公司生产的“佩乐能”(Pegintron○R)PEG-rhIFNα-2b[1
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  摘要目的：建立聚乙二醇化重组人干扰素α-2b(PEG-rhIFNα-2b)注射液纯度测定方法。方法：采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)，对凝胶银染并扫描；采用体积排阻高效液相色谱法(SEC-HPLC)，使用TSKG3000SW(7.8mm×300mm)凝胶柱，流动相：0.2mol·L-1PB-0.2mol·L-1NaCI-异丙醇(48.5/48.5，3，v/v)；流速：0.6ml·min-1；检测波长：280nm；采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)，使用C8(4.6mm×250mm)色谱柱，流动相：A液：0.1%三氟乙酸溶液；B液：95%乙腈的A液，梯度：0%～100%B(30min)；流速：1mL·min-1；检测波长：214nm。结果：三种方法测得PEG-rhIFNα-2b的纯度分别为100%、100%、98.90%。结论：三种方法均适用于PEG-rhIFNα-2b注射液纯度测定。检测结果符合生物制品质量控制规定。

 关键词：聚乙二醇化重组人干扰素α-2b；纯度；SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法；分子排阻HPLC；反相HPLC；

 中图分类号：Q503 R927.2 文献标识码：A 文章编号：1673-6273(2009)12-2342-03