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 陈静园 马越云 彭道荣 苏明权 郝晓柯 第四军医大学西京医院全军临床检验医学中心;

 【摘要】目的:构建幽门螺杆菌ArsRS双组分系统基因突变株。方法:以幽门螺杆菌标准菌株11637为模板,PCR扩增ArsS、ArsR基因;扩增产物分别克隆于载体pID700A1中,化学法转化感受态大肠杆菌E.coli DH5α,使其在细菌内同源重组,双酶切筛选得到重组载体,然后将重组载体经电转化法转化幽门螺杆菌标准菌株,获得幽门螺杆菌ArsS、ArsR突变株。结果:PCR获得了360bp、350bpArsS、ArsR基因,构建了插入ArsS、ArsR基因的重组载体pID700A1-ArsS、pID700A1-ArsR。经双酶切分析显示,所得条带与设计结果完全一致。PCR方法扩增突变株结果显示ArsS、ArsR基因已缺失。结论:成功构建了幽门螺杆菌ArsS、ArsR突变株,为ArsS、ArsR基因的检测和新型药物靶点以及疫苗的研究奠定基础。

 【关键词】 幽门螺杆菌 ArsRS双组分系统 载体构建

 【分类号】R378

 前言幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hpylori)是革兰阴性、螺杆菌属细菌,是目前唯一一种定植于人胃的病原菌。目前,全球约50%的人口感染幽门螺杆菌,我国人口感染率高于世界平均水平,为50%~70%[1]。研究证实,它是慢性活动性胃炎、消化性溃疡的主要病因,并与胃癌、胃粘膜相关淋
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  摘要 目的：构建幽门螺杆菌ArsRS双组分系统基因突变株。方法：以幽门螺杆菌标准菌株11637为模板，PCR扩增ArsS、ArsR基因；扩增产物分别克隆于载体pID700A1中，化学法转化感受态大肠杆菌E.coli DH5α，使其在细菌内同源重组，双酶切筛选得到重组载体，然后将重组载体经电转化法转化幽门螺杆菌标准菌株，获得幽门螺杆菌ArsS、ArsR突变株。结果：PCR获得了360bp、350bp ArsS、ArsR基因，构建了插入ArsS、ArsR基因的重组载体pID700A1-Arss、pID700A1-ArsR。经双酶切分析显示，所得条带与设计结果完全一致。PCR方法扩增突变株结果显示Arss、ArsR基因已缺失。结论：成功构建了幽门螺杆菌ArsS、ArsR突变株，为ArsS、ArsR基因的检测和新型药物靶点以及疫苗的研究奠定基础。

 关键词：幽门螺杆菌；ArsRS双组分系统：载体构建

 中图分类号：R377

 文献标识码：A

 文章编号：1673-6273(2009)09-1691-03