参见附件。
【摘要】 背景与目的 肝癌(hepatic carcinoma)是我国常见恶性肿瘤之一，死亡率高，在恶性肿瘤死亡顺位中仅次于胃癌、食道癌而居第三位。本研究将探索性地研究Frizzled-9在所有的肝细胞癌中都有表达，并且表达多少与肝癌的扩散及侵袭相关，而且，干扰了肝癌细胞FZ9后，通过Transwell小室模型检测被剔除了FZ9基因HepG-2细胞移动能力，为探寻治疗胰腺癌的新策略提供思路。方法 应用RT-PCR方法检测肝癌细胞株HepG-2的FZ9的表达情况。并应用脂质体基因转染技术转染FZ9-siRNA至肝癌细胞株HepG-2。通过Transwell小室模型分析肝癌细胞的移动、侵袭性。结果 Frizzled-9特异的siRNA明显抑制HepG-2细胞中FZ9及蛋白的表达，与对照组比较其抑制率为97.6%。转染Frizzled-9-siRNA(5nM)24小时后对肝癌细胞的转移及侵袭能力有显著影响(P〈0.05)，实验组较空白组转移及侵袭能力减弱。
【关键词】 Frizzled-9；RNA干扰(RNAi)；肝癌；细胞侵袭
doi：10.3969/j.issn.1004-7484(s).2013.08.063 文章编号：1004-7484(2013)-08-4170-01
1 实验方法
1.1 细胞培养 用RPMI1640完全培养基培养细胞。待细胞进入对数生长期，即可用于下一步实验。
1.1.1 siRNA转染细胞 采用Hiperfect Transfection Reagent介导的脂质体转染技术。参阅其产品说明书进行转染，实验分4组：空白对照组：HepG-2常规培养，不予干预，阴性对照组：转染通用对照shRNA(HK)或转染带有荧光标记的对照siRNA ......
