【摘要】 将TCRVβ7.1基因克隆入腺病毒穿梭质粒pDC315中，再穿梭质粒和腺病毒骨架质粒共转染HEK293细胞，包装出重组腺病毒。然后用PCR，RT-PCR对其进行鉴定。
【关键词】 TCR；重组腺病毒载体；TCRVβ7.1
能够特异识别抗原肽-MHC复合物的T 细胞受体(T cell antigen receptor ,TCR)，在肿瘤抗原的识别及杀伤过程中具有重要作用[1,2]，将肿瘤抗原特异性识别的TCR基因转染T细胞用于杀伤肿瘤细胞，是肿瘤免疫治疗的方法之一[3]。在以往实验中发现转染TCRVβ7.1基因的T细胞对肝癌细胞株BEL-7402[4]杀伤活性明显提高，由于脂质体的转染率较低和毒性较大，现构建重组腺病毒载体Ad.TCRVβ7.1，以提高转染率和降低毒性。
1材料与方法
1.1质粒、菌株和细胞
AdMaxTM 腺病毒包装系统(腺病毒骨架质粒、腺病毒穿梭质粒pDC315、HEK293细胞)购自加拿大Microbix公司；PBMC从人血分离；质粒pcDNA3.1- TCRVβ7.1、Hela(宫颈癌细胞)及大肠杆菌E.coli DH5α由本室保存 ......
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