昆山吉和力仪器有限公司(以下简称“吉和力”)是一家提供专业服务和仪器设备的集成供应商，公司以用户实际需求为导向，提供最合适、性价比最高的仪器，致力于打造一站式服务平台。为了让业内人士对qPCR进行更加深入的了解，吉和力整理了一些相关常见问题，并对这些问题一一进行了解答。

 qPCR的英文全称是Real-time Quantitative PCR Detecting System，即实时荧光定量核酸扩增检测系统，也叫实时定量基因扩增荧光检测系统，简称qPCR。

 简单来说，qPCR就是利用荧光信号的变化，实时监测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化，通过Ct值和标准曲线的分析对起始模板进行定量分析。而常规的PCR无法对起始模板准确定量，无法对扩增反应实时监测。

 如何提高RT-PCR反应的灵敏度与特异性？

 ①确定模板RNA完整性，无DNA污染；

 ②RNA模板中不应含有扩增反应抑制剂；

 ③为了防止模板降解，在反应体系中加入RNase抑制剂RNasin；

 ④使用适量的模板RNA，模板量太多会降低特异性，太少会导致扩增不出条带或条带太弱；

 ⑤若模板中有二级结构，可通过提高逆转录反应温度来提高扩增效果；

 ⑥设计引物时 ......
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