所有176种限制性内切酶均使用统一缓冲液，酶切就是如此简单。赛默飞FastDigest限制性核酸内切酶是一套用于快速酶切的高级内切酶，是一种由176种限制性内切酶组成的高级酶切系统，统一缓冲液可实现100%的酶活性。具有如下优势：
在5-15分钟内完成酶切缓冲液与下游应用100%兼容酶切后可直接上样进行凝胶电泳下载FastDigest限制性内切酶海报 ›
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FastDigest系列内切酶是目前业内最丰富的限制性核酸内切酶产品系列之一。在酶学领域数十年的专业积累、丰富的同裂酶选择、顶级生产设施带来的高纯度酶生产能力，共同助力打造出首款使用统一缓冲液体系的限制性内切酶系统。
FastDigest限制性内切酶的优势 FastDigest 限制性内切酶传统限制性内切酶缓冲液体系一种统一缓冲液多达20种缓冲液双重/多重限制性酶切无拘无束——所有176种酶均使用一种统一缓冲液，且在其中均具有100%活性受缓冲液兼容性限制反应时间5-15分钟1小时至过夜酶切后可直接上样进行凝胶电泳是否
下游实验应用100%兼容缓冲液部分兼容
星号活性否是活性定义在 FastDigest 缓冲液中，1 μL FastDigest 酶可在5至15分钟内切割 1 μg 底物 DNA在酶的最佳缓冲液中，1单位酶可在60分钟内水解 1 μg λDNA缓冲液具有100%活性
FastDigest绿色缓冲液及FastDigest无色缓冲液是我们独有的酶切缓冲液，对所有FastDigest限制性内切酶都具有100%活性。该缓冲体系可使用任意限制酶组合实现双重和多重酶切。无需连续酶切或更换缓冲液。
5分钟内在FastDigest绿色缓冲液中完成单重、双重和三重酶切5分钟质粒DNA酶切比较：
泳道 M：Thermo Scientific GeneRuler Express 分子量标准（货号: SM1553）泳道1：对照，未酶切的质粒 DNA泳道2：FastDigest EcoRI泳道3：FastDigest EcoRI和FastDigest KpnI泳道4：FastDigest EcoRI、FastDigest KpnI和FastDigest SmaI缓冲液与下游实验应用100%兼容DNA/RNA修饰酶，如连接酶、磷酸酶、激酶和嗜温DNA聚合酶在FastDigest无色和FastDigest绿色缓冲液中具有100％活性。因此，在下游应用中使用的酶可以直接加到FastDigest反应混合物中。不需要缓冲液更换或纯化步骤。
DNA/RNA 修饰酶货号在FastDigest绿色缓冲液/FastDigest缓冲液中的活性DNA 聚合酶 I，大肠杆菌EP0041EP0042100%Klenow 片段EP0051
EP0052100%Klenow 片段 (exo-)EP0421
EP0422100%T4 DNA 聚合酶EP0061
EP0062100%T7 DNA 聚合酶EP0081100%T4 DNA 连接酶*EL0011
EL001275–100%FastAP 热敏碱性磷酸酶EF0651
EF0652
EF0654100%T4 多聚核苷酸激酶EK0031
EK0032100%
* T4 DNA连接酶活性需要0.5 mM ATP。
FastDigest限制性内切酶能在5-15分钟内完成酶切使用统一缓冲液在5-15分钟内完成双重和多重酶切：
节省时间和精力，提高酶切通量。针对不同种类的DNA模板（质粒DNA、PCR产物、基因组DNA）提供相应建议的酶切时间。快速酶切，无需酶切过夜。反应时间短，无星号活性。常规限制性内切酶连续酶切FastDigest 限制性内切酶
一种反应混合物Apal的反应体系构建约2分钟FastDigest ApaI和XhoI的反应体系构建约2分钟孵育60分钟孵育5分钟Xhol的反应体系构建约2分钟——孵育60分钟——总时间 2小时总时间 7分钟使用绿色缓冲液，酶切后可直接进行凝胶电泳
基于方便性考虑，我们开发了FastDigest绿色缓冲液，其与FastDigest无色缓冲液具有同样的性能，但可将酶切反应混合物直接上样进行凝胶电泳。10X FastDigest绿色缓冲液包含密度试剂和两种示踪染料，从而可以实现直接上样电泳。蓝色染料在1%琼脂糖凝胶中的迁移率与3-5 kb DNA片段接近，并在424 nm时出现激发峰；而黄色染料在1%琼脂糖凝胶中的迁移速度稍快于10 bp DNA片段，并在615nm时出现激发峰。
FastDigest 绿色缓冲液含有FastDigest绿色缓冲液的反应混合物：
泳道1：电泳前，上样至凝胶孔泳道2：电泳后分离FastDigest限制性内切酶反应时间短，无星号活性FastDigest限制性内切酶与FastDigest（无色或绿色）缓冲液结合使用，可消除星号活性：
反应时间短（5-15分钟），无需长时间酶切统一缓冲液，具有适用于所有酶的最佳pH和盐浓度优化的酶和甘油浓度使用常规限制性内切酶，当在较长的反应时间、高酶浓度和高甘油浓度、高 pH 值或低离子强度情况下，可能表现出星号或“松弛”活性。FastDigest限制性内切酶很好的解决了所有这些问题，可在5分钟内实现单重、双重甚至三重酶切，无任何星号活性出现。
FastDigest限制性内切酶在5分钟内完成质粒DNA的单重和双重酶切，无星号活性迹象5分钟质粒DNA酶切比较：
泳道1：FastDigest SmaI泳道2：FastDigest EcoRI泳道3：FastDigest SmaI 和 FastDigest EcoRI 双酶切泳道 M：GeneRuler 1 kb Plus DNA 分子量标准（货号: SM1333）泳道 C：对照，未酶切的质粒 DNA参考文献应用文献使用 FastDigest EcoRI 和 BamHI 限制性内切酶制备 Golden Gate 克隆载体。Wang T, Wang D, Lyu Y, et al.(2018) Construction of a high-efficiency cloning system using the Golden Gate method and I-SceI endonuclease for targeted gene replacement in Bacillus anthracis.J Biotechnol 271:8–16. FastDigest BpiI (BbsI) Type IIS 型限制性内切酶用于构建 gRNA。 Kurata M, Wolf NK, Lahr WS, et al.(2018) Highly multiplexed genome engineering using CRISPR/Cas9 gRNA arrays.PLoS ONE 13(9):e0198714. FastDigest TaaI 限制性内切酶用于 PCR 产品的 RFLP 分析。Fong WY, Ho CC, Poon WT.(2017) Comparison of Direct Sequencing, Real-Time PCR-High Resolution Melt (PCR-HRM) and PCR-Restriction Fragment Length Polymorphism (PCR-RFLP) Analysis for Genotyping of Common Thiopurine Intolerant Variant Alleles NUDT15 c.415C T and TPMT c.719A G (TPMT*3C).Diagnostics (Basel) 7(2):27. 使用 FastDigest HindIII 限制性内切酶进行 ddPCR 前基因组 DNA的 片段化。 Li B, Kaushik S, Kalinowski P, et al.(2018) Droplet digital PCR shows the D-Loop to be an error prone locus for mitochondrial DNA copy number determination.Sci Rep 8(1):11392. 相关资源实验助手：FastDigest 限制性内切酶FastDigest 限制性内切酶宣传页FastDigest 限制性内切酶反应条件FastDigest 限制性内切酶选择工具限制性酶切和去磷酸化实验方案用户指南：DNA 双重和多重酶切用户指南：DNA 快速酶切用户指南：多种 DNA 样本的酶切反应体系配制用户指南：扩大DNA 酶切反应体系支持中心 Vector NTI Express 或 Vector NTI Express Designer Vector NTI AdvanceFastDigest 限制性内切酶数据文件仅供科研使用，不可用于诊断目的。
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