血清中游离胆固醇占总胆固醇含量的30%左右，病理情况下此比例会有所不同。临床检验中一般只测定血清总胆固醇，如果需要分别测定胆固醇酯与游离胆固醇，可采用毛地黄皂苷沉淀出抽提液中的游离胆固醇部分进行测定，也可用硅酸层层析法或酶法测定。

肝脏是胆固醇合成的重要器官，当肝实质细胞功能减退时，卵磷脂胆固醇酰基转移酶活力降低，影响胆固醇的酯化，所以严重肝硬化、肝炎患者虽然血清总胆固醇水平不一定低下，但酯化胆固醇所占的比例可下降至50%以下(正常时约70%)。但此指标不够灵敏，并不适于作为肝功能的指标。