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摘要： [目的]探讨急性、慢性砷暴露对小鼠成纤维细胞(NIH 3T3细胞)氧化还原状态的影响，进而探讨其对细胞谷胱甘肽(GSH)水平、相关酶活性及其基因表达的影响。[方法]将经过不同浓度砷处理的细胞，抽提细胞总蛋白。采用经过改进的C1ark法测定细胞中谷胱甘肽；采用THomas法测定谷胱甘肽还原酶(GR)活性；使用分光光度法测定谷胱甘肽与1—氯—2，4—二硝基苯(CDNB)的结合以确定谷胱甘肽转移酶(GST)活性。采用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳和固定化蛋白质的免疫学测定法测定血红素氧化酶(HO—1)蛋白表达；采用RNA印迹法测定谷胱甘肽还原酶(GR)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—R)的基因表达。[结果]急性砷处理细胞在较低浓度范围可以引起GSH水平的增加；而当砷浓度高于25/-tmol几时，GSH水平降低；在0.1和0.5 tmol/L慢性染毒之后细胞GSH水平明显降低。然而，在急性和慢性砷处理组CST和GR的活性均有升高，而在高浓度24h处理组则显著降低；GR的mRNA水平与GR的活性相一致，在急、慢性染毒组中均表现为GR的mRNA表达上调；砷可以引起血红素氧化酶—1(HO—1)蛋白水平的增加。急性、慢性砷处理均引起GSH—RmRNA表达下调。[结论]三价砷可以引起氧化应激、GSH水平改变、以及相关酶活性及其基因表达的改变，急性与慢性砷接触对GSH系统的影响不尽相同，不同染砷浓度的作用也有不同。长期低浓度砷暴露所致GSH水平变化以及相关酶活性及其基因表达的改变在砷致病机制中可能起到十分重要的作用。
关键词： 砷；谷胱甘肽；酶活性；基因表达
http://www.100md.com/html/paper/1006-3617/2003/06/03.htm
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