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[摘 要]目的 将人的酷氨酸羟化酶(hTH)和胶质细胞源性神经营养因子(hGDNF)基因共同转染SH-SY5Y细胞,筛选可同时高效稳定表达TH和GDNF的工程细胞,探讨其在帕金森病(PD)基因治疗中的作用。方法 将hTH和hGDNF cDNA插入表达载体pcDNA3.0和pcDNA3.1,构建重组真核表达载体pcDNA3.1/hGDNF和pcDNA3.0/hTH,然后转染至SH-SY5Y细胞系,利用RT-PCR鉴定和筛选出高效稳定表达阳性克隆。将此工程细胞与大鼠原代多巴胺能神经元共培养,免疫细胞化学检测观察多巴脂能神经无的数目和生长状态。结果 (1)双转基因工程细胞可防止多巴脂能神经元退变死亡,与对照组比较,神经元数目最多提高了2.8倍(p+)对多巴脂能神经元的毒性损伤作用,与对照组比较,细胞数目增加了83.6%(为7.6倍,p
http://www.100md.com/html/paper/0254-9026/2005/03/16.htm
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