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PPARs激动剂体外筛选模型的建立及其在泽泻活性成分筛选中的

  [摘要]利用酵母GAL4 BD-UAS反式激活分析(transactivation assay)系统在哺乳动物细胞中建立以过氧化物酶体增殖物受体的配体结合结构域(PPARs-LBD,包括PPARα,PPARβ和PPARγ)为靶点的体外筛选模型,并应用该模型对泽泻化学成分进行筛选,研究泽泻14种化学成分对PPARs的激活作用。首先构建GAL4 BD-PPARsLBD融合表达质粒pBind-PPARs-LBD,采用Lipofectamine将表达质粒pBind-PPARs-LBD与含有UAS:luciferase报告质粒pGL4.35共转染293T细胞。以PPARs的激动剂(PPARα:非诺贝特;PPARβ:L165041;PPARγ:罗格列酮)为阳性对照,通过测定萤火虫荧光素酶活性来验证系统是否构建成功,并用该系统来考察泽泻中14种化学成分对PPARs靶点激活的影响。PPARs的阳性激动剂结果显示系统构建成功 ...... 第 1 2 3 4 5 页 下一页
 百拇医药网 http://www.100md.com/html/paper/1001-5302/2016/21/21.htm
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